Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч)




НазваниеHcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч)
страница2/5
Дата03.02.2016
Размер4,54 Kb.
ТипДокументы
1   2   3   4   5

Данный метод может применяться без разбавления образцов, содержащих от 1 до 500 мМЕ/мл ХГЧ. Первичная калибровка по Первому международному эталону ВОЗ IRP-(75/537) для ХГЧ (1).

2. Справка


Хорионический гонадотропин человека (ХГЧ) является сиалогликопротеином с молекулярным весом ~40,000 дальтон. Гормон представляет собой две неравных субъединицы, альфа и бета. Альфа-субъединица ХГЧ по своей структуре очень близка альфа-цепям лютеинизирующего гормона (ЛГ), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) и тиреотропного гормона (ТТГ). Биологическую специфичность этим гормонам придают различия в структуре их бета-субъединиц, что также объясняет их иммунологические различия (2). Бета-субъединица ХГЧ аналогична бета-субъединице ЛГ; она имеет дополнительные остатки аминокислот на С-конце цепи и гликозилирована в большей степени. Тогда как, гликозилирование имеет небольшое влияние или почти не влияет на активность или иммунологические свойства ХГЧ, оно влияет на метаболизм гормона; удаление углеводных остатков значительно снижает период его биологической полужизни (3).

Физиологическое действие ХГЧ отражает его структурное сходство с ЛГ. ХГЧ секретируется в больших количествах клетками плазмодиотрофобласта плаценты, и в первые недели беременности служит для поддержания функции желтого тела после его нормального периода жизни (4). При этом, образование эстрогена и прогестерона, необходимых для поддержания эндотелия, продолжается, позволяя беременности развиваться. Позднее по ходу беременности, у плаценты появляется способность самой секретировать достаточные количества стероидных гормонов, а образование ХГЧ понижается. Также было высказано предположение, что плацентарный синтез и секреция ХГЧ защищает плаценту от воздействия материнской иммунной системы (5). Другой активностью, напоминающей ЛГ, является стимулирование образования тестостерона в яичках мужского плода, необходимого для нормальной маскулинизации. ХГЧ может также продуцироваться в относительно больших количествах разнообразными опухолями, особенно опухолями трофобластического происхождения, такими как хориокарцинома и тератома (6).

Основная клиническая значимость измерения ХГЧ заключается в тестирование на наличие беременности. После опубликования первого научно-обоснованного теста на беременность (7), чувствительность анализов ХГЧ повысилась, и теперь беременность можно обнаружить даже до момента отсутствия очередной менструации (8). Однако, недавнее исследование (9) показало, что «беременность» можно детектировать с помощью чувствительных анализов ХГЧ при отсутствии каких-либо других признаков зачатия. Такое событие часто называют как «химическая беременность», и его появление говорит о том, что не следует уверенно диагностировать беременность до момента отсутствия очередной менструации. Измерения ХГЧ могут быть полезными в дифференциальной диагностике внематочной беременности (10). Анализы ХГЧ не позволяют надежно различить нормальную и внематочную беременности, но могут предупредить врача о возможности внематочной беременности у женщины с болью в животе.

3. Принцип метода


Для анализа ХГЧ на Eclectica анализаторе необходимы:

  1. Тест-система для определения ХГЧ Eclectica: специфические реагенты тест-системы Eclectica hCG Reagent Kit для выполнения тестирования и проверки калибровки.

  2. Тест-система для калибровки ХГЧ Eclectica: для стандартизации.

  3. Тест-система общих реагентов для иммунохимии Eclectica: для реакции общей химии.

  4. Промывающий раствор для иммунохимии Eclectica: специфический промывающий раствор для иммунохимии.

  5. Системный промывающий раствор Eclectica для анализатора Eclectica.

В методике анализа Eclectica ХГЧ используются три типа высокоспецифичных моноклональных антител в системе иммуноферментного анализа, который включает стадию магнитного твердофазного разделения. Все времена инкубации и объёмы реагентов определяются специфическим протоколом программного обеспечения.

Определенные количества флуоресцеин-конъюгированных моноклональных антител к β-субъединице ХГЧ и двух типов моноклональных Fab антител к ХГЧ, конъюгированных со щелочной фосфатазой, добавляются к образцу, контролю, или стандарту. Реакционная смесь инкубируется при 37ºС. В процессе инкубации флуоресцеин-конъюгированные моноклональ-ные антитела к β-субъединице ХГЧ связываются с определенным сайтом β-субъединицы. Моноклональные Fab антитела к ХГЧ, конъюгированные со щелочной фосфатазой, связываются с интактной молекулой ХГЧ или с β-субъединицей ХГЧ, образуя сэндвич.

В конце инкубационного периода анти-флуоресцеин, связанный с магнитной твердой фазой, добавляется в избытке. Он быстро и специфично связывается с комплексами ХГЧ или комплексами моноклонального антитела с β-ХГЧ и осаждается в магнитном поле.

После удаления жидкой фазы и промывки твердой фазы, раствор ферментного субстрата, фенолфталеин-монофосфат, добавляется в инкубационную ячейку, и каждая ячейка инкубируется при 37ºС. После инкубации, ферментная реакция останавливается добавлением стоп-раствора, а интенсивность окраски измеряется фотометрически. Интенсивность окраски прямо пропорциональна, в рамках рабочего диапазона теста, концентрации ХГЧ в образце. Концентрация ХГЧ в образце пациента или контроле затем определяется методом интерполяции по сохраненной стандартной кривой.
1   2   3   4   5

Похожие:

Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч) iconInternational electrotechnical commission (iec) system for certification to standards relating to equipment for use in

Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч) iconThe Analysis of Induction Motor Rundown Regime Concomitant Electromechanical Processes in Two Phase Coordinate System α,β

Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч) iconSystem of the territorial device of russia: concept, structure, construction principles
Система территориального устройства россии: понятие, структура, принципы построения
Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч) iconУрок в 11 классе Положение человека в системе органического мира
Цель: Познакомить учащихся с развитием взглядов на происхождение человека, сформировать знания о систематическом положении современного...
Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч) iconThe Donetsk University of Transportation Systems and Technology ( daat ) and the Ukrainian Union of Scientific and Engineering Associations (uusea)
«Independent accreditation agency in the transport engineer’s training system in Ukraine»
Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч) iconСша официальный сайт Совета управляющих Федеральной резервной системы США (Board of Governors of the Federal Reserve System) статистика денежно-кредитной политики, банковского сектора США
Официальный сайт Совета управляющих Федеральной резервной системы США (Board of Governors of the Federal Reserve System) статистика...
Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч) iconPedagogical innovations in the Polish educational system and the new reform of education in range of higher education on the basis of Pedagogical University of Cracow

Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч) iconЭкспериментальная образовательная программа По основам православной культуры
В сегодняшней жестокой действительности ребёнку необходимо введение в традиционную духовную культуру. Ведь культура – это организованная...
Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч) iconEstradiol system Эстрадиол
Тест-система Eclectica Estradiol Reagent Kit разработана для количественного определения Эстрадиола в человеческой сыворотке и гепаринизированной...
Hcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч) iconОбщественное объединение
Республике Беларусь прав человека, гарантированных Конституцией Республики Беларусь, действующим законодательством, а также декларированных...
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©lib2.znate.ru 2012
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница