Estradiol system Эстрадиол




НазваниеEstradiol system Эстрадиол
страница2/6
Дата04.02.2016
Размер4,65 Kb.
ТипДокументы
1   2   3   4   5   6

Данный метод может применяться для измерения концентраций Эстрадиола в диапазоне от 10 до 1600 пг/мл (36,7 – 5824 пмоль/л).

2. Справка


Эстрадиол (эстра-1,3,5(10)-триен-3,17β-диол) является С18 стероидным гормоном с молекулярным весом 272,4 дальтон. Представляет собой наиболее сильнодействующий природный эстроген, который синтезируется в основном зрелыми фолликулами яичников и плацентой у женщин, и в малых количествах – надпочечниками, и яичками у мужчин (1, 2, 3). Эстрадиол (Е2) секретируется в кровоток, где 98% гормона циркулирует в виде комплекса с глобулином, связывающим половые гормоны, и в меньшей степени с другими сывороточными белками, например, альбумином. Только малая часть циркулирует в виде свободного гормона или в конъюгированной форме (4, 5). Эстрогенная активность проявляется благодаря образованию комплексов эстрадиол-рецептор, которые инициируют соответствующий ответ на ядерном уровне в целевых сайтах. Эти сайты включают фолликулы, матку, грудь, влагалище, уретру, гипоталамус, гипофиз, и в меньшей степени печень и кожу.

У небеременных женщин с нормальным менструальным циклом секреция эстрадиола происходит по циклической, двухфазной схеме с наивысшей концентрацией непосредственно перед овуляцией (6, 7). Возрастающая концентрация эстрадиола считается доказательством влияния положительной обратной связи на уровне гипофиза, где он регулирует секрецию гонадотропинов, фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), и лютеинизирующего гормона (ЛГ), которые необходимы для созревания фолликулов и овуляции, соответственно (8, 9). После овуляции, уровни эстрадиола быстро падают до тех пор, пока лютеальные клетки не становятся активными, вызывая вторичный слабый подъём и плато эстрадиола в лютеальной фазе. Во время беременности уровни сывороточного эстрадиола значительно возрастают, намного выше уровней преовуляторного периода, и высокие уровни поддерживаются в течение всей беременности (10).

Измерения сывороточного эстрадиола являются полезным показателем в оценке разнообразных менструальных дисфункций, таких как преждевременное половое созревание или его задержка у девочек (11), первичная или вторичная аменорея и менопауза (12). Имеются данные, что уровни эстрадиола повышаются при наличии эстрадиол-секретирующих опухолей (13). У мужчин обнаружено, что уровни сывороточного эстрадиола повышаются у больных с феминизирующим синдромом (14), гинекомастией (15), и тестикулярными опухолями (16).

В случаях бесплодия, измерения сывороточного эстрадиола полезны для мониторинга индукции овуляции, вызванной лечением, например, цитратом кломифена, фактором, способствующим выработке лютеинизирующего гормона, или экзогенными гонадотропинами (17, 18). В процессе гиперстимуляции яичников для оплодотворения in vitro (IVF), концентрации сывороточного эстрадиола обычно определяются ежедневно для выбора оптимального времени приёма хорионического гонадотропина человека и сбора ооцитов (19).

3. Принцип метода


Для тестирования Эстрадиола на анализаторе Eclectica необходимы:

  1. Тест-система для определения Эстрадиола Eclectica: специфические реагенты тест-системы Eclectica Estradiol Reagent Kit для выполнения тестирования и проверки калибровки.

  2. Тест-система для калибровки Эстрадиола Eclectica: для стандартизации.

  3. Тест-система Разбавитель проб 3 Eclectica: для разбавления образцов с высокой концентрацией.

  4. Тест-система общих реагентов для иммунохимии Eclectica: для реакции общей химии.

  5. Промывающий раствор для иммунохимии Eclectica: специфический промывающий раствор для иммунохимии.

  6. Системный промывающий раствор Eclectica для анализатора Eclectica.

В методике анализа Eclectica Эстрадиол используются кроличьи поликлональные антитела к Эстрадиолу в системе иммуноферментного анализа, который включает стадию магнитного твердофазного разделения. Все времена инкубации и объёмы реагентов определяются специфическим протоколом программного обеспечения.

Определенные количества флуоресцеин-конъюгированных антител к Эстрадиолу и конъюгата Эстрадиола, конъюгированного со щелочной фосфатазой, добавляются к образцу, контролю, или стандарту. Реакционная смесь инкубируется при 37ºС. В процессе инкубации Эстрадиол в образце, контроле или калибраторах, конкурирует с конъюгатом за связывание с антителами к Эстрадиолу.

В конце инкубационного периода анти-флуоресцеин, связанный с магнитными частицами, добавляется в избытке. Он быстро и специфично связывается с комплексом антител с Эстрадиол и осаждается в магнитном поле.

После удаления жидкой фазы и промывки твердой фазы, раствор ферментного субстрата, фенолфталеин-монофосфат, добавляется в инкубационную ячейку, и каждая ячейка инкубируется при 37ºС. После инкубации, ферментативная реакция останавливается добавлением стоп-раствора, а интенсивность окраски измеряется фотометрически. Интенсивность окраски обратно пропорциональна, в рамках рабочего диапазона теста, концентрации Эстрадиола в образце. Концентрация Эстрадиола в образце пациента или контроле затем определяется методом интерполяции по сохраненной стандартной кривой.
1   2   3   4   5   6

Похожие:

Estradiol system Эстрадиол iconInternational electrotechnical commission (iec) system for certification to standards relating to equipment for use in

Estradiol system Эстрадиол iconThe Analysis of Induction Motor Rundown Regime Concomitant Electromechanical Processes in Two Phase Coordinate System α,β

Estradiol system Эстрадиол iconSystem of the territorial device of russia: concept, structure, construction principles
Система территориального устройства россии: понятие, структура, принципы построения
Estradiol system Эстрадиол iconThe Donetsk University of Transportation Systems and Technology ( daat ) and the Ukrainian Union of Scientific and Engineering Associations (uusea)
«Independent accreditation agency in the transport engineer’s training system in Ukraine»
Estradiol system Эстрадиол iconСша официальный сайт Совета управляющих Федеральной резервной системы США (Board of Governors of the Federal Reserve System) статистика денежно-кредитной политики, банковского сектора США
Официальный сайт Совета управляющих Федеральной резервной системы США (Board of Governors of the Federal Reserve System) статистика...
Estradiol system Эстрадиол iconPedagogical innovations in the Polish educational system and the new reform of education in range of higher education on the basis of Pedagogical University of Cracow

Estradiol system Эстрадиол iconHcg system Хорионический гонадотропин человека (хгч)
Тест-система Eclectica hcg reagent Kit разработана для количественного определения хорионического гонадотропина человека (хгч) в...
Estradiol system Эстрадиол iconДоклада "математическая теория криптографии", датированного 1 сентября 1945 года. Затем он был рассекречен, и в 1949 году опубликован в техническом журнале корпорации Bell System
В теоретическом плане и имеет своей целью дополнить положения, приводимые в обычных работах по криптографии. В этих работах детально...
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©lib2.znate.ru 2012
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница