Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза




Скачать 19,01 Kb.
НазваниеМорфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза
страница1/2
Дата04.02.2016
Размер19,01 Kb.
ТипАвтореферат
  1   2


На правах рукописи


Смекалина Олеся Юрьевна


МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ КИШЕЧНИКА ПОТОМСТВА САМОК КРЫС С ХРОНИЧЕСКИМ ПОРАЖЕНИЕМ ПЕЧЕНИ РАЗЛИЧНОГО ГЕНЕЗА


03.03.04 Клеточная биология, цитология, гистология


Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук


Оренбург, 2011

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Челябинская Государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»


Научный руководитель доктор медицинских наук, профессор

Брюхин Геннадий Васильевич


Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Полякова Валентина Сергеевна

доктор медицинских наук, профессор

Корнеев Геннадий Иосифович


Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Тюменская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации


Защита диссертации состоится « » июня 2011 года в часов на заседании диссертационного совета Д 208.066.04 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу: Россия, 460000, г. Оренбург, ул. Советская, 6, зал заседаний диссертационного совета.


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации


Автореферат разослан « » мая 2011 г.


Ученый секретарь

диссертационного совета Н.Н. Шевлюк

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Воспроизводство здорового населения является ведущей проблемой современного общества. Уже известно, что согласно предварительным итогам Всероссийской переписи населения 2010 года, население наше по сравнению с прошлой (2002 года) переписью уменьшилось на 2,2 миллиона человек, или на 1,6 процента (СмольяковаТ., 2011). Даже на фоне реализации национальных проектов («Здоровье», «Мать и дитя») остаются сниженными все основные показатели, определяющие репродуктивное здоровье населения (Римашевская Н.М., 2004). В связи с этим перед учеными разных специальностей ставится задача по поиску выхода из сложившейся ситуации, так как репродуктивное здоровье россиян является, в конечном итоге, важнейшим фактором национальной безопасности (Фролова О.Г., Токова З.З., 2000).

Общепризнанна важная роль материнского организма в решении проблемы воспроизводства полноценного потомства (Бурдули Г.М., Фролова О.Г., 1997; Медведь В.И., 1999). Из-за ослабления здоровья матерей растут показатели младенческой смертности (по разным регионам они наблюдаются от 18 до 40 на тысячу), причем в структуре причин ведущую роль стабильно играют патологические состояния перинатального периода (Вельтищев Ю.Е., 1999; Курцер М.А., 2000; Кулаков, В.И. с соавт., 2000). Доказано влияние на физическое развитие и здоровье новорожденного экстрагенитальной патологии (Барашнев Ю.И., 1991; Медведь В.И., 2001, 2004; Грищенко В.И. с соавт., 1992). Частота экстрагенитальной патологии среди беременных женщин очень высока и составляет 35-50% (Heppard M.C.S., 2002), а по некоторым данным даже 60-80% (Шехтман М.М., 2003).

Широко распространенной является патология гепатобилиарной системы (Безнощенко Г.Б., Дроздов В.Н., Неверовский О.А., 1995). Заболевания печени крайне негативно сказываются на развитии плода и здоровье новорожденного (Фарбер Н.А., Мартынов К.А. , Гуртовой Б.Л., 1990; Игнатова Т.М. с соавт., 1993; Майер К.-П., 1999; Кузьмин В.Н., 2008). Установлено, что потомство матерей с хроническими заболеваниями печени рождается с отставаниями в физическом развитии, предрасположенностью к различным инфекционным заболеваниям, в том числе к заболеваниям желудочно-кишечного тракта (Савченков Ю.И., Лобынцев К.С., 1980; Брюхин Г.В., 1988-2008; Г.В. Брюхин, А.Ю. Грачев, 1990; Бояков А.А., 1998, 1999; Брюхин Г.В., Евченко Е.В., 2004; Николина О.В., 2004; Пивень Г.В., 2004; Федосов А.А., 2004; Вторушина Е.В., 2005; Кузнецова А.Б., 2006; Леонов Н.В., 2007; Барышева С.В., 2008; Ильиных М.А., 2009; Пашнина Е.Н., 2009; Сизоненко М.Л., 2009; Gambarin-Gelwan M., 2007).

Одним из факторов, определяющих реактивность и резистентность живого организма, является морфофункциональное состояние пищеварительной системы. В связи с этим представляет большой интерес изучение влияния хронического поражения печени на состояние слизистой оболочки тонкого и толстого кишечника потомства.

Целью настоящего исследования явился анализ особенностей морфофункционального становления слизистой оболочки тонкого и толстого кишечника потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени различного генеза.

Для достижения поставленной цели нами были сформулированы следующие задачи:

  1. Оценить особенности структурно-функционального становления в различные периоды постнатального онтогенеза слизистой оболочки тонкого и толстого кишечника потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени различного генеза.

  2. Проанализировать морфофункциональные особенности популяции тучных клеток кишечника потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени в различные сроки постнатального периода.

  3. Изучить структурно-функциональные особенности популяции диффузных эндокринных клеток эпителия слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением гепатобилиарной системы в различные сроки постнатального онтогенеза.

  4. Исследовать морфологические особенности индуктивного и эффекторного звеньев гастроассоциированной лимфоидной системы потомства самок крыс с хроническим поражением гепатобилиарной системы.

Положения, выносимые на защиту

  1. Экспериментальная патология печени самок крыс, обусловленная введением супернатанта культуры E.сoli и D(+)-галактозамина, является существенным фактором риска, неблагоприятно влияющим на антенатальное и постнатальное морфофункциональное становление слизистой оболочки кишечника потомства.

  2. Структурно-функциональные нарушения становления слизистой оболочки пищеварительной системы потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением печени сопровождаются выраженными изменениями числа и функционального состояния интестинальных тучных клеток.

  3. Хроническое экспериментальное поражение гепатобилиарной системы матери различной этиологии обусловливает нарушение количественного и качественного состава диффузных эндокринных клеток эпителия слизистой оболочки кишечника потомства.

  4. У потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением печени различного генеза имеет место нарушение морфофункционального становления индуктивного и эффекторного звеньев лимфоидной системы слизистой оболочки тонкого и толстого кишечника в период постнатального развития.

Научная новизна

В условиях эксперимента, отражающего различные формы поражения печени, выявлено влияние патологии гепатобилиарной системы самок крыс на морфофункциональное становление слизистой оболочки тонкого и толстого кишечника потомства в различные сроки постнатального онтогенеза.

Впервые произведена комплексная морфофункциональная оценка клеточного состава эпителия слизистой оболочки различных отделов кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени.

Новыми являются данные, свидетельствующие, что морфологические изменения слизистой оболочки тонкого и толстого кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени сопровождаются изменением числа и функциональной активности эндокриноцитов. Впервые предложена функциональная классификация эндокринных клеток диффузной эндокринной системы эпителия слизистой оболочки кишечника по степени их дегрануляции.

Обнаружены нарушения морфофункционального становления индуктивного и эффекторного звеньев гастроассоциированной лимфоидной системы, а так же морфофункциональные изменения субпопуляционного состава тучных клеток слизистой оболочки тонкого и толстого кишечника подопытных животных.

Установлены общие закономерности нарушений морфофункционального состояния слизистой оболочки различных отделов кишечника потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени различного генеза.

Практическое и теоретическое значение

Диссертационное исследование относится к фундаментальным. Результаты проведенного исследования расширяют представление о роли патологии гепатобилиарной системы матери в нарушении морфофункционального состояния пищеварительной системы, в том числе ее лимфоидного и эндокринного аппарата, у потомства. Результаты настоящего исследования позволяют оценить особенности взаимодействия различных структурных компонентов слизистой оболочки тонкого и толстого кишечника потомства матерей с экспериментальным хроническим поражением печени, что расширяет представление о тканевом гомеостазе и адаптации данного органа.

Полученные результаты позволяют теоретически обосновать выделение детей от матерей с хроническим заболеванием печени в группу повышенного риска по заболеваниям органов желудочно-кишечного тракта.

Результаты диссертационного исследования используются в научном и учебном процессах кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии Челябинской государственной медицинской академии: разделы «Пищеварительная система», «Эндокринная система», «Нарушения внутриутробного развития человека».

Апробация работы

Результаты исследования были представлены на конференции, посвященной 65-летию кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии Челябинской государственной медицинской академии (Челябинск, 2009); на Всероссийской конференции дипломированных специалистов «Молодые ученые – медицине» (Самара, 2010); на III Международной научно-практической конференции «Адаптации биологических систем к естественным и экстремальным факторам среды» (Челябинск, 2010); на I международной (VIII итоговой) научно-практической конференции молодых ученых (Челябинск, 2010); на VIII Всероссийской конференции по патологии клетки (Москва, 2010); на XI международной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные исследования, разработка и применение высоких технологий в промышленности» (Санкт-Петербург, 2011); на совместном заседании кафедр гистологии, эмбриологии и цитологии, анатомии человека, нормальной физиологии, патологический физиологии, Челябинской государственной медицинской академии (2011).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 9 работ, в том числе 3 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК для публикации материалов докторских и кандидатских диссертаций.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 302 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы описания результатов собственного исследования, обсуждения результатов исследования, выводов, списка использованной литературы, включающего 315 наименований, в том числе 122 работ зарубежных авторов. Работа содержит 50 таблиц, 79 рисунков, в том числе 35 микрофотографий.


МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальные исследования проведены на белых лабораторных крысах (самках) «Вистар» (70 взрослых самок крыс) и их потомстве (229 животных из 70 пометов) в различные сроки постнатального онтогенеза (на 1-ые, 15-ые, 30-ые, 45-ые и 60-ые сутки). Сроки исследования выбраны с учетом общепризнанного подразделения возрастных периодов у крыс (Западнюк И.П. с соавт., 1983).

Исходя из поставленных задач данного исследования, экспериментальные животные были разделены на 3 группы. Первую группу составили животные от интактных матерей (контрольная группа) – «К» (90 животных из 24 пометов). Во вторую группу вошло потомство от матерей с хроническим экспериментальным поражением печени с помощью E.coli – 1-ая опытная группа (63 животных из 16 пометов). Третью группу составили животные от матерей с хроническим экспериментальным D-галактозаминовым поражением печени – 2-ая опытная группа (76 животных из 30 пометов). Исследования проводились с учетом суточных и сезонных колебаний. Животные содержались в одинаковых условиях вивария с одинаковым пищевым рационом. Работа с экспериментальными животными проводилась в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием лабораторных животных».

Модель хронического поражения печени путем введения супернатанта культуры Eoli. Экспериментальному животному (половозрелой самке) под эфирным наркозом в три участка печени – по одной с обеих сторон у основания мечевидного отростка и справа у края реберной дуги по срединно-ключичной линии вводили 0,2 мл супернатанта шестидневной культуры E.coli (штамм АТСС 25922) в разведении 1:4. В течение 24 часов после введения сенсибилизирующей инъекции экспериментальные животные получали только воду. Разрешающая инъекция производилась через 24 часа путем введения в хвостовую вену супернатанта шестидневной культуры E.coli в разведении 1:4 из расчета 0,3 мл/кг массы тела животного. Возникающие морфологические и функциональные изменения, согласно данным литературы, подобны таковым при гепатите А (Сааков Б.А. с соавт., 1967).

Модель хронического поражения печени путем введения D(+)-галактозамина. Данную модель хронического поражения печени создавали путем внутрибрюшинного введения D(+)-галактозамина гидрохлорида («Sigma-G0500», США) на 0,9% растворе натрия хлорида в дозе 250 мг/кг массы тела животного. Возникающий при этом комплекс морфологических, иммунологических и биохимических изменений, согласно данным литературы, в определенной мере подобен таковому при вирусном гепатите В у человека (Венгеровский А.И., Саратиков А.С., 1988; Joker А.M., 1990; Сугробова Н.П. с соавт., 1992).

Биологические методы исследования. У животных опытной и экспериментальной групп произведен анализ числа живых родившихся плодов, числа случаев фетальной смерти, численность помета, распределение животных по полу, весовые характеристики крысят в различные сроки постнатального онтогенеза. Оценивали состояние систем жизнеобеспечения потомства экспериментальных животных. С этой целью определяли показатель динамики нарастания массы тела.

Гистохимические методы исследования. Выделяли следующие участки желудочно-кишечного тракта: нисходящая часть двенадцатиперстной кишки, начальный отдел тощей кишки, дистальный отдел подвздошной кишки, проксимальный отдел толстой кишки. Продольными разрезами выделенные участки делились на две одинаковые половины и фиксировались одна часть в жидкости Буэна, а вторая – в абсолютном спирте. Дальнейшее уплотнение материала производилось путем заливки в парафин (Саркисов Д.С., Перова М.П., 1991). Полученные гистологические срезы из материала, зафиксированного в жидкости Буэна, окрашивали гематоксилином и эозином и импрегнировали нитратом серебра по Гримелиусу в модификации Никонова для выявления эндокринных клеток диффузной эндокринной системы в слизистой оболочке органов (Райхлин Н.Т. с соавт., 1996). Гистологические срезы из материала, зафиксированного в абсолютном спирте, окрашивали 0,1% раствором толуидинового синего для выявления тучных клеток (Саркисов Д.С., Перова М.П., 1991). Окраску 0,1% раствором толуидинового синего использовали и для выявления бокаловидных клеток кишечника (Елисеев В.Г., 1967).

Морфометрические методы исследования. Для морфометрического исследования был использован программно-аппаратный комплекс для анализа обработки изображений в микроскопии, состоящий из тринокулярного микроскопа Motic BA – 400 Т, цифровая цветная система ввода изображений на базе цифровой камеры ProgRes C3, 1/1.8" высокого разрешения не менее 2080×1542 и лицензионного программного обеспечения «Видео Тест – Морфология 5.0».

Осуществлялся подсчет количества элементов рельефа (ворсинок и крипт) на единицу условной площади (на 100 мкм.) и их качественные характеристики (высота, максимальная ширина, средняя площадь продольного сечения ворсинки, глубина и ширина крипт) на серийных гистологических срезах. Проводили подсчет клеточных элементов в слизистой оболочке в расчете на 1 ворсинку и 1 крипту.

Изучались характеристики кишечных энтероцитов, в частности, их высота и ширина. Производилось вычисление среднего диаметра ядер эпителиоцитов (мкм, диаметр эллиптического ядра равен полусумме взаимно перпендикулярных размеров), вычислялся объем ядер данных клеток по «формуле эллипсоида»: V=πLB2/6, где L и B – больший и меньший диаметры ядра (в мкм3) (Хмельницкий О.К., Третьякова М.С., 1998).

Подсчитывалось количество бокаловидных клеток, межэпителиальных лимфоцитов, диффузно расположенных лимфоцитов собственного слоя слизистой оболочки различных отделов кишечника в расчете на 1 ворсинку и на 1 крипту. В слизистой оболочке кишечника проводили оценку площади лимфоидных фолликулов и их функциональных зон. Объем лимфоидных фолликулов рассчитывали в соответствии с формулами соотношения поверхности и объема биологических структур (Быков В.Л., 1975).

Для анализа популяции эндокринных клеток диффузной эндокринной системы слизистой оболочки пищеварительного тракта производили подсчет клеток из расчета на одну ворсинку и на одну крипту, оценивался субпопуляционный состав клеток по степени и характеру гранулярного насыщения, а также степени дегрануляции с вычислением индекса дегрануляции. Анализ популяции тучных клеток производили по общепринятой методике Линднер Д.П. и др. (1980). При этом подсчитывалось абсолютное количество тучных клеток в слизистой оболочке и подслизистой основе в расчете на кишечную ворсинку и кишечную крипту и их субпопуляционный состав по уровню гранулярного насыщения и степени дегрануляции.

Статистические методы исследования. Статистическая обработка производилась на персональном компьютере с помощью лицензированного пакета прикладных программ «Statistica 6.0» («StatSoft, Inc.»). При обработке полученных результатов использовались методы вариационной статистики (определение среднего арифметического и его ошибки (М±м)). Достоверность результатов оценивалась с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни. При этом достоверными считались различия, где уровень значимости (р) был меньше 0,05 (Платонов А.Е., 2000). Кроме того, использовали метод ранжирования, который заключается в определении места (ранга) объектов проводимого исследования.

  1   2

Похожие:

Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза icon8. Специфические поражения слизистой оболочки полости рта (сифилис, туберкулез, лепра). Проявления гонореи в полости рта
Все это приводит к значительному снижению реактивных резервов организма, слизистой оболочки полости рта и способствует развитию инфекционных...
Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза iconВлияние интенсивной мышечной нагрузки на морфофункциональное состояние репродуктивных органов самок крыс
Фгбу «Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии» Министерства здравоохранения и социального развития Российской...
Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза iconАктивность Na+, K+-атфазы плазматических мембран клеток печени и мозга крыс при хронической алкогольной интоксикации и при введении уксуснокислого цинка

Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза icon19. Предраковые заболевания слизистой оболочки полости рта и красной каймы губ
Поэтому своевременное выявление предраковых заболеваний и их адекватное лечение является основным звеном профилактики рака
Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза iconХирургическое и криохирургическое лечение рецидивного альвеококкоза печени
В статье приводятся результаты хирургического лечения шести пациентов с рецидивным альвеококкозом печени. Пяти пациентам проведены...
Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза iconИммунокоррегирующая терапия заболеваний слизистой оболочки полости рта
Доктор медицинских наук, профессор Валентина Ивановна Спицина – фгоу «Институт повышения квалификации федерального медико-биологического...
Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза iconНормативные критерии структурно-функциональной изменчивости слизистой оболочки нижней губы (по данным прижизненных хейлостоматоскопических исследований)
«Воронежская государственная медицинская академия имени Н. Н. Бурденко» Министерства здравоохранения и социального развития Российской...
Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза iconВозрастные особенности слизистой оболочки полости рта и губ
Работа выполнена в Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии сзо рамн и Санкт-Петербургском государственном медицинском...
Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза iconЛфк при язвенной болезни Клиника язвенной болезни
Язвенная болезнь хроническое, циклически протекающее заболевание с разнообразной клинической картиной и изъязвлением слизистой оболочки...
Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза iconПроявления в полости рта заболеваний крови актуальность темы
Более того, одними из ранних признаков патологии кроветворной системы, являются разнообразные изменения со стороны слизистой оболочки...
Разместите кнопку на своём сайте:
Библиотека


База данных защищена авторским правом ©lib2.znate.ru 2012
обратиться к администрации
Библиотека
Главная страница